Langendorff 離體心臟灌流系統(tǒng)
Langendorff灌流是將離體動物心臟在恒溫恒壓條件下,將心臟套管插入主動脈,逆行灌流含氧的(KH液),由冠狀動脈灌流心肌,灌流液經(jīng)冠狀靜脈竇從右心房、肺動脈端流出,以維持離體心臟在外界正常的生理活動。Langendorff灌流系統(tǒng)是研究離體心臟電生理活動最常用的一種技術(shù),與在體心臟研究相比,它不受神經(jīng)、體液的調(diào)節(jié),影響因素少,而且可控性強(qiáng)(如前負(fù)荷、后負(fù)荷、營養(yǎng)液成分、溫度等均可調(diào)節(jié))。因此,離體心臟模型廣泛運(yùn)用于醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域生理,藥理、生化等基礎(chǔ)與臨床相關(guān)科室的研究領(lǐng)域。
Langendorff離體心臟灌流系統(tǒng)(恒流)
Langendorff離體心臟灌流系統(tǒng)通過控制溫度及流速,改變刺激或改變控制因素研究離體心臟的電生理活動的變化。它由溫控系統(tǒng)、灌流系統(tǒng)、供氧裝置三部分組成,確保離體心臟正常的生理活動。

Langendorff離體心臟灌流系統(tǒng)配件展示
技術(shù)指標(biāo):
- 此為恒流灌流。
- 溫控范圍:室溫~100℃。
- 控溫精度:±0.5℃。
- 水槽尺寸:390×330×180 mm。
- 灌流罐尺寸:200 mL/500 mL。
- 回流罐尺寸:100 mL/200 mL。
- 流量:0.02 ~ 380 mL/min。
- 轉(zhuǎn)速范圍:0.1~100 rpm(正反可調(diào))。
- 轉(zhuǎn)速分辨率:0.1 rpm。
- 蠕動泵尺寸:232×142×149 mm。
- 工作環(huán)境:溫度0~40℃,相對濕度<80%。
- 防護(hù)等級:IP31。
Langendorff離體心臟灌流系統(tǒng)適用動物:小鼠,大鼠,豚鼠,兔子等。
實(shí)驗(yàn)動物 |
灌流速度 |
小鼠 |
2~4mL/min |
大鼠 |
8~10mL/min |
豚鼠 |
6~8mL/min |
兔子 |
30mL/min左右 |
······ |
······ |
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、配制KH液(1 L):使用前,提前充氧(95% O
2 +5% CO
2 )飽和。取80 mL KH 液于-20℃預(yù)冷(取心臟時使用,冰水混合物最佳)。
試劑名稱 |
C(mM) |
MW(g.mol-1) |
g/L |
NaCl |
119 |
58.44 |
6.9544 |
NaHCO3 |
25 |
84.01 |
2.1003 |
KCl |
4 |
74.55 |
0.2982 |
KH2PO4 |
1.2 |
136.08 |
0.1633 |
MgCl2 |
1 |
95.2 |
0.0952 |
CaCl2 |
1.8 |
146.98 |
0.2646 |
D-glucose |
10 |
180.16 |
1.8016 |
2、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:
(1)系統(tǒng)使用前的清洗:打開水浴鍋,先用燒開的去離子水沖洗系統(tǒng),再用未加熱去離子水沖洗系統(tǒng),使系統(tǒng)保持潔凈,并調(diào)節(jié)到相應(yīng)的灌流速度(注:大小鼠,豚鼠等選擇相應(yīng)的灌流速度。記錄流速、泵速值和出液口流速值。記錄三次取平均值。)水浴鍋內(nèi)的水需每兩個月更換一次。
(2)給 KH 液充氧飽和。排出灌流系統(tǒng)內(nèi)空氣,使灌流液充滿整個管路;
分別記錄水浴鍋、灌流罐KH液、出液口的溫度(溫度測三次取平均值,若有一次測量溫度誤差大于1℃,則棄之重測)以及周圍環(huán)境的溫度。(注:開始充氧到掛心臟 30~40 min)。
(3)打開循環(huán)水加熱系統(tǒng),調(diào)節(jié)循環(huán)水溫度,使流出的循環(huán)水溫度為 37 ℃(注:每次溫度測定 3 遍,取平均溫度,分別測量環(huán)境溫度,水浴鍋,灌流罐KH液和出液口的溫度)。
3、配制所用藥物:
給動物注射肝素鈉(生理鹽水配制終濃度 1000 U/ml):小鼠 100 U/20 g;豚鼠、大鼠 3125 U/kg。
4、灌流心臟:
將動物固定于實(shí)驗(yàn)平臺,注射麻藥,處死動物取其心臟,后將心臟主動脈連接到主動脈插管上,并用手術(shù)縫合線系緊。打開調(diào)試好的灌流系統(tǒng)開始灌流,進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
5、儀器清洗:
實(shí)驗(yàn)完畢后,排干灌流系統(tǒng)內(nèi)的KH液,并清洗管路。

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